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揭秘:试管婴儿技术显微镜下的操作过程

试管婴儿的具体过程是,双方先检查身体,排除疾病。用药物促排卵治疗,让女方长多个泡,卵泡成熟后经超声阴道从阴道后穹隆穿刺取... 查看全部

试管婴儿的具体过程是,双方先检查身体,排除疾病。用药物促排卵治疗,让女方长多个泡,卵泡成熟后经超声阴道从阴道后穹隆穿刺取卵,把卵子取出来在体外跟精子受精,培养成胚胎后,再把胚胎移植进女方的宫腔内。一般移植后14天查血确定是否怀孕。怀孕后要继续用药物进行黄体支持治疗,至怀孕后8~1 0周停药。

试管婴儿具体流程

在显微镜下观察受精卵

视频主讲

试管婴儿并不是试管中长大的婴儿,而是先将精子和卵子从人体中取出,然后再放在显微镜下观察,让它们在体外受精形成受精卵,在通过实验室培养液培养,发育到一定程度移植到母亲子宫中去。试管婴儿其实和普通的婴儿没有差别,只是多了一个体外培养的过程,其实在体外培养胚胎的成活率也许更高,因为可控性更强。自然怀孕,受精卵在体内发育,反而各种问题不好解决。让我们来看看试管婴儿实验室的操作流程。

胚胎培养

精子和卵子在培养液中

试管婴儿技术显微镜下的操作过程

我们都知道试管婴儿是先进性体外受精,在进行胚胎移植,试管婴儿的手术流程:术前检查、促排卵、取精取卵、体外受精、胚胎培养、植入母体、确定妊娠等流程相比大家都知道了,今天给大家讲的是实验室显微镜下的操作流程,感受一下科学技术下生命的奥秘!

取卵前一天

提问 取卵前一天工作人员会做什么?

回答 取卵的前一天实验室工作人员会根据临床递单的情况配制取卵当天所用试剂,包括:冲针液,卵子体外操作液,受精液,胚胎培养液等。多数试剂(如胚胎培养液和受精液)必须放入二氧化碳培养箱平衡6小时以上才能使用。

取卵取精当天

1、早上八点半左右开始取卵,实验室人员把卵子颗粒细胞复合体(OCC)从卵泡液中捡出放入操作液中洗涤,除去粘附的红细胞及血块,转入受精液中培养2-4小时。

2、取卵的同时男方病人手淫或穿刺取精子,实验室人员对精液做常规分析,根据情况决定授精方式。

培养箱

将取出的精子和卵子放入培养箱中培养,培养箱相当于女性的子宫,温度保持在37℃,湿度、二氧化碳和氧气浓度等都参照人体相关指数调节。培养箱每一层隔板上,放着几个透明玻璃皿,精子卵子在其中培养。

筛选精子

从显微镜下可以看待镜子的活动速度,一般那些速度极快,非常活跃的精子都是筛选的目标,也就说明精子的质量好,捕捉这些“小蝌蚪”需要非常高超的技巧,用很细很细的针快准吸取,但是不能损伤它们。

筛选出健康的精子

质量好的精子更活跃

卵子预处理

取到卵子后,医生会立刻送入实验室,手术室和实验室通过一个小窗口相连。

提问 准备受精的卵子怎么处理呢?

回答 分为两步

1、第一时间拨开卵子周围的颗粒膜细胞。

2、实验室人员对卵子进行评级:成熟卵、未成熟卵、变异卵,挑选最优秀的卵子。

体外受精

受精是指成熟卵母细胞完成第二次减数分裂并与精子结合形成受精卵,精子的数量很多,卵子的数量只有一个,那一颗质量最好的精子才能够进入卵细胞,最后受精成功,孕育新生命。

步骤

  • 1实验人员将在显微镜下挑选出优秀的精子和卵子放进培养箱进行培养,放入培养液观察受精情况。
  • 2看到第二极体为受精(2PB),受精卵子数小于成熟卵子的50%时,隔半个小时再观察。
  • 3如果受精卵子数仍没达到成熟卵子的50%,将剩余未受精的成熟卵子行补救ICSI(RICSI)。
  • 418小时后精子和卵子自由结合。

受精过程

精子不能自己传统卵母细胞外层就需要实验室人员帮忙了!用显微操作针帮助精子穿透卵母细胞外层的卵丘细胞后,精子与卵母细胞透明带结合并且穿透,精卵细胞膜融合并且相互激活,最后雌雄原核形成。IVF-ET中通常在授精后16-18小时通过对原核的判断来评估是否受精。

体外受精有两种方式

显微操作针帮助精子穿透卵母细胞外层

体外受精方式

授精方式有两种,IVF和ICSI,一般都在当天下午进行。

1、IVF主要针对精液常规正常,受精情况良好的患者。

将洗涤好的精液按一定的受精浓度加入受精液中,再和OCC一起培养到当天下午四点。

2、ICSI主要针对重度少、弱精患者。

实验室人员14:00将OCC放入透明质酸酶中消化,取出包裹在卵子外面的颗粒细胞,将卵子和精子放入ICSI皿中,用显微操作针挑选质量好的精子,按每个卵子一条精子的方式注入。

Tips:

如果取出精液不理想,一般情况下实验室人员会提醒男方取精一个小时后再次取精,将两次合并洗涤最终决定受精方式。

取卵后第一天(N为原核数)

早上八点开始观察受精情况:

1、正常受精卵有两个原核称为2PN。

2、大于2PN的受精卵不能利用。

1PN和0PN胚胎在没有其它可胚胎可选择的情况下,可利用,但要告知病人风险。

取卵后第二天

早上八点开始观察卵裂胚情况:

1、胚胎一般为6-8细胞;

2、有些胚胎发育缓慢为2-5细胞,;

3、有些过快可以发育到融合胚。

与患者沟通决定是否冷冻、养囊胚或移植。

同意囊胚培养的病人,实验室人员会将胚胎换入新的培养皿中继续培养至第五天。

观察卵裂胚情况

胚胎一般为6-8细胞

取卵后第五天

早上八点观察囊胚情况:

1、如果有4-6期囊胚,与病人交流决定是否移植或冷冻。

2、如果是融合胚、早期囊胚或3期囊胚,继续培养,根据第六天的情况再决定是否冷冻或移植。

胚胎质量

胚胎等级

胚胎等级分a,b,c,d级

  • 1a是较优秀的胚胎,最理想的胚胎;
  • 2b级是良好的胚胎,最常见的胚胎;
  • 3c级属于一般的胚胎,使试管成功率会降低;
  • 4d级不能使用。

胚胎等级划分

胚胎等级分a,b,c,d级

囊胚等级

囊胚的发育分为六个时期:

时期 怀孕率 体积
1期 20-30% 早期有腔室囊胚,囊胚腔小于胚胎总体积的1/2
2期 30-40% 囊胚腔体积大于或等于胚胎总体积的1/2
3期 40-50% 完全扩张囊胚,囊胚腔完全占据了胚胎的总体积
4期 50-60% 扩张囊胚,囊胚腔完全充满胚胎,胚胎总体积变大,透明带变薄
5期 60-70% 正在孵出的囊胚,囊胚的一部分从透明带中逸出
6期 60-70% 孵出的囊胚,囊胚全部从透明带中逸出

囊胚等级

囊胚发育的五个时期

细胞团,滋养层细胞分为abc三级

细胞 a级 b级 c级
细胞团

细胞数目多,

排列紧密

细胞数目少,

排列松散

细胞数目很少
滋养层细胞

上皮细胞层由较多的细胞组成,

结构致密

上皮细胞层由不多的细胞组成,

结构松散

上皮细胞层由稀疏的细胞组成
Tips:

比如说:4bb的意思

4表示:4期,处于扩张期的囊胚;

第一个字母“b”:说明内细胞团细胞数目少,排列松散;

第二个字母“b”:说明上皮细胞层是由不多的细胞组成,结构松散。

提问 最好的囊胚有哪些?

回答 下面两种

1、最好的囊胚是第5天的囊胚3AA,第6、7天的囊胚4AA。

2、优质囊胚为:第五天,3AA 3AB 3BA 3BB 或是第六七天 4AA 4AB 4BA 4BB。

讲完所有的流程,再给大家讲一下常见疑惑。

提问 所有卵子都能受精吗?卵子质量怎么划分?

回答 当然不是,只有成熟的卵子才能受精。

卵子质量

卵子按照成熟程度分为五级:

  • 1一级为GV期;
  • 2二级为MI期;
  • 3三到四级为MII期;
  • 4五级为过熟期。

卵子质量划分

卵子按照成熟程度分为五级

1、一级和二级卵子为没有极体的卵子,不能进行受精,就像一个人还没有发育完全就想结婚生子显然是不行的。

2、过于熟的卵子,颗粒细胞少,开始退化,也不能受精,年纪太大了,身体各方面条件不行了,也生不了孩子了。

 

提问 卵胞浆内单精子注射技术和体外受精的区别?

回答 这样说大家就明白了,体外受精是第一代试管婴儿,卵胞浆内单精子注射技术是第二代试管婴儿。

单精子显微注射技术主要针对男性因素,男性有严重的少、弱、畸精子症的时候就要用到这个技术。

提问 实验室人员是怎样的观察是否正常受精的呢?

回答 判断依据

正常受精卵有两个清晰的原核(2PN)

医护人员在授精后16-18小时在倒置显微镜下观察受精卵情况,正常受精卵有两个原核(2PN),一个来自卵子,一个来自精子。只有一个原核、大于或等于三个原核的都不是正常受精。

两个人在一起,不能一厢情愿,更不能三心二意,所以只有一心一意,两情相悦的爱情才是完美的哦!

异常受精

1、无原核0PN

原因:

  • 1可能为精子与卵子未受精;
  • 2卵母细胞染色体数目异常;
  • 3雌雄原核过早成熟导致原核消失等。

虽然其后也可卵裂成胚胎,但这些胚胎发育阻滞,非整倍体、三倍体及嵌合体等染色体异常率较高。

两个人在一起,连一颗真心都没有,是不会长久的!

2、一个原核1PN

原因:

  • 1可能为只有雌原核的1PN发生;
  • 2只有雄原核的1PN发生;
  • 3卵母细胞的孤雌激活;
  • 4雌雄原核融合形成一个原核或者雌雄原核的不同步发育。

一人单方面的付出或者一厢情愿,这样的爱情是不平等的!

3、多个原核多PN

原因:

  • 1多个精子进入卵子;
  • 2精子进入异常卵母细胞等;

多精受精可导致早期胚胎死亡、流产和胎儿遗传性疾病。

明明是两个人的生活,小三、小四挤进来,这样的爱情不要也罢!

Tips:

受精是一个复杂的过程,虽然IVF实验技术比较成熟,但都有可能出现受精失败的情况。

IVF治疗周期中低受精与完全不受精发生率在10%左右,精子因素是IVF受精失败的主要原因,卵母细胞也是关键因素之一。常规IVF不受精的患者,可选择卵胞浆内单精子注射技术,受精成功率更高。

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